Evaluación del efecto antagónico de las cepas de Trichoderma spp. contra Phytophthora spp. en Tectona grandis L.f.. pp. 1 - 16 /
Volumen 6, número 3 / DOI: https://doi.org/10.37431/conectividad.v6i3.260
Fecha de recepción: 06 / 03 / 2025
Fecha de aceptación: 24 / 04 / 2025
Fecha de publicación: 18 / 07 / 2025
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Evaluación del efecto antagónico de las cepas de Trichoderma spp. contra
Phytophthora spp. en Tectona grandis L.f.
Evaluation of the antagonistic eect of Trichoderma spp. strains against Phytophthora spp.
on Tectona grandis L.f.
RESUMEN
El objetivo del trabajo fue evaluar el potencial de cepas de Trichoderma spp.
como biocontroladores de Phytophthora spp., el agente causante de la muerte
ascendente en Tectona grandis (teca). Se aislaron especies de Trichoderma
y Phytophthora, de suelos de plantaciones afectadas, utilizando medios de
cultivo como PDA y Agar V8. Se efectuaron pruebas de antagonismo in vitro
empleando cultivos duales para determinar el Porcentaje de Inhibición del
Crecimiento Radial (PICR) de Phytophthora spp. La efectividad antagónica de
las cepas de Trichoderma se constató mediante una evaluación comparativa,
el diseño experimental consto de tres repeticiones por tratamiento, así como
un control. Los resultados evidenciaron que las cepas T. virens 1, T. virens 2,
T. harzianum y T. longibrachiatum alcanzaron porcentajes de inhibición del
crecimiento radial de 66.26 %, 62.26 %, 59.48 % y 57.77 %, respectivamente,
uso de Trichoderma como alternativas sostenibles a los fungicidas químicos.
identidad, facilitando su implementación en programas de manejo integrado de
enfermedades. Estos hallazgos sugieren que el empleo de Trichoderma spp. no
solo puede mitigar los efectos de Phytophthora spp., sino también mejorar la
sostenibilidad de las plantaciones de teca, promoviendo así prácticas agrícolas
más ecológicas.
Palabras clave:
Inoculación; Inhibición del crecimiento.
ABSTRACT
The objective of this work was to evaluate the potential of Trichoderma spp.
strains as biocontrollers of Phytophthora spp. as the causal agent of the upward
dieback on Tectona grandis (teak). Trichoderma and Phytophthora spp. were
antagonism tests were carried out using dual cultures to determine the Percentage
of Inhibition of Radial Growth (PICR) of Phytophthora spp. The antagonistic
evaluation, the experimental design consisted of three replicates per treatment,
as well as a control. The results showed that the strains T. virens 1, T. virens
2, T. harzianum and T. longibrachiatum achieved radial growth inhibition
percentages of 66.26 %, 62.26 %, 59.48 % and 57.77 %, respectively, compared
sustainable alternatives to chemical fungicides. Morphological and molecular
Phytophthora spp. but also improve the sustainability of teak plantations, thus
promoting more environmentally friendly agricultural practices.
Keywords:
Growth Inhibition.
Derechos de Autor
Los originales
publicados en las
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publicación de la
revista son del Instituto
Superior Tecnológico
Universitario Rumiñahui,
por ello, es necesario
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Internacional.
Citas
Castro Castro, J.,
Cedeño Moreira, A.,
Belezaca Pinargote, C.,
De La Cruz Vichicela,
K., & Suin Miranda,
P. (2025). Evaluación
de cepas Antagónicas
de Trichoderma spp.,
contra Phytophthora sp.,
en Tectona grandis L.f.
CONECTIVIDAD, 6(3).
https://doi.org/10.37431/
conectividad.v6i3.260
Artículo Cientíco
Jonathan Gabriel Castro Castro , Angel Virgilio Cedeño Moreira , Carlos Eulogio Belezaca
Pinargote
, Karina Margoth De La Cruz Vichicela , Paola Margarita Suin Miranda
Universidad Técnica Estatal de Quevedo, jonathan.castro2015@uteq.edu.ec, Quevedo, Ecuador
Universidad Técnica Estatal de Quevedo, acedenom@uteq.edu.ec, Quevedo, Ecuador
Universidad Técnica Estatal de Quevedo, cbelezaca@uteq.edu.ec, Quevedo, Ecuador
Universidad Técnica Estatal de Quevedo, karina.delacruz2015@uteq.edu.ec, Quevedo, Ecuador
Universidad Técnica Estatal de Quevedo, psuinm2@uteq.edu.ec, Quevedo, Ecuador
Autor para correspondencia: jonathan.castro2015@uteq.edu.ec
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1. INTRODUCCIÓN
La “muerte ascendente” en Tectona grandis, comúnmente conocida como teca, es causada
por el patógeno Phytophthora
plantaciones tropicales. Este patógeno afecta principalmente a las raíces del árbol, provocando
una muerte progresiva que impacta negativamente en la productividad forestal (Erwin y Ribeiro,
1996; García et al., 2013). La necesidad de buscar soluciones efectivas para este problema ha
llevado a la investigación de alternativas más sostenibles en el control de enfermedades.
Tradicionalmente, se han utilizado fungicidas químicos para combatir a Phytophthora spp. No
patógenos para desarrollar resistencia, además de causar daños al medio ambiente (Barnett y
biológicos que reduzcan los efectos negativos en la ecología.
En este estudio se emplearon cepas de Trichoderma spp., organismos que han adquirido relevancia
de patógenos, entre ellos Phytophthora
cepas, ya que su caracterización morfológica y molecular posibilita la selección de aquellas
con mayor potencial antagonista, tanto en ensayos in vitro como en condiciones de invernadero
(Sandoval et al., 2014).
sostenibilidad en los sistemas agrícolas, al reducir la dependencia de fungicidas químicos,
factores relevantes en donde la resistencia de los patógenos y el impacto ambiental son
et al., 2022; Matas et al., 2023). En este contexto, la
investigación sobre Trichoderma
manejo integrado de plagas, al fomentar prácticas agrícolas más responsables y ecológicas.
Trichoderma spp. como biocontrolador no se limitan solo a la
inhibición de patógenos. Evidencias reportadas en estudios anteriores señalan que estos hongos
también pueden estimular el crecimiento y la resiliencia de las plantas, a través de mecanismos
et al., 2022).
Esto subraya el potencial de Trichoderma dentro de un enfoque de manejo integrado, que no
La incorporación de cepas de Trichoderma spp. en las prácticas agrícolas constituye una
efectivos a corto plazo, implican elevados costos económicos y afectan negativamente el medio
ambiente (Matas et al., 2023). Por consiguiente, el empleo de Trichoderma representa una
principios de sostenibilidad en la agricultura.
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Por lo tanto, el presente estudio tiene como objetivo evaluar el potencial de diferentes cepas de
Trichoderma spp. como agentes de control biológico contra Phytophthora
bosques tropicales, proponiendo alternativas viables al uso de químicos sintéticos en el manejo
de enfermedades en plantaciones de teca.
2. MATERIALES Y MÉTODOS
Este estudio se llevó a cabo en el Laboratorio de Microbiología y Biología Molecular de la
Universidad Técnica Estatal de Quevedo (UTEQ) y en un invernadero experimental. El objetivo
fue evaluar la capacidad antagónica de cepas de Trichoderma spp., como biocontrolador frente
a Phytophthora spp., patógeno causante de la enfermedad “muerte ascendente” en plantaciones
de Tectona grandis L.f. (teca).
Aislamiento y caracterización de las cepas
Se recolectaron muestras de suelo en diferentes plantaciones de teca ubicadas en los cantones
Quevedo, Buena Fe y Valencia, en Ecuador. Estas muestras fueron procesadas en el laboratorio
utilizando técnicas de aislamiento en medios selectivos como Papa Dextrosa Agar (PDA) y
Agar V8 para obtener cepas nativas de Trichoderma spp y Phytophthora spp., (Velasteguí et
al., 2010). Las muestras se incubaron a 28°C durante 7 días para favorecer el crecimiento de los
Aislamiento de Trichoderma spp.
Las muestras de suelo provenientes de plantaciones forestales fueron procesadas, fue pesada
con 1 g y luego colocada en un matraz Erlenmeyer de 100 mL. Después 30 minutos de agitación,
suspensión y se distribuyeron en placas Petri.
Aislamiento de Phytophthora spp.
medio selectivo Agar jugo V8, propuesta por Erwin y Ribeiro (1996) y Díaz y Bravos (2015).
Caracterización morfológica
de Trichoderma aisladas se realizó según los criterios de Barnett y Hunter (1998). Para ello,
se prepararon microcultivos de cada muestra y se realizaron observaciones microscópicas con
lente objetivo 40 X, para un aumento total de 400 y así apreciar con calidad las características
et al., 2021).
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Las cepas de Phytophthora spp se caracterizó a través de la guía de Erwin y Robeiro (1996),
considerando varios caracteres morfológicos de las cepas (micelio, esporangio, oosporas,
clamidosporas) con un microscopio Olympus BX50. Se tomaron fotografías de las estructuras
fúngicas. El crecimiento del micelio se observó en placa Petri para cada individuo (Gárcia et
al., 2017).
Caracterización molecular
Las muestras fúngicas fueron enviada al laboratorio ID gen ubicada en Quito. Donde se
realizó la extracción de ADN por el método de extracción por fenol-cloroformo, utilizando
aproximadamente 100 mg de muestra, seguida de la evaluación de la integridad y calidad del
ADN mediante espectrofotometría de microvolúmenes y visualización en gel de agarosa. El
mediante PCR utilizando los primers EF1-alfa: EF1-983F/EF1-2218R.
Posteriormente, las secuencias obtenidas se limpiaron y ensamblaron utilizando programas
bioinformáticos. Finalmente, se compararon las secuencias ensambladas de las muestras con la
et al.,
2021).
Pruebas in vitro de antagonismo
Para evaluar la capacidad de las cepas de Trichoderma spp., de inhibir el crecimiento de
Phytophthora spp., se realizaron pruebas de confrontación en cultivos duales en medios de
cultivo PDA y Agar V8 (Acosta et al., 2021). Se colocaron discos de 5 mm de cada hongo en
los extremos opuestos de placas de Petri, a una distancia de 8 cm, y se incubaron a 25°C. El
crecimiento del patógeno se midió cada 24 horas durante 7 días.
Se calcularon los valores medios de porcentaje de Inhibición del Crecimiento Radial (PICR) la
fórmula empleada por (Acosta-Marcano et al., 2020) [1]:
Donde:
R1= radio mayor (radio de patógeno testigo).
R2= radio menor (radio del patógeno en enfrentamiento con el antagonista).
Este estudio se llevó a cabo en el Laboratorio de Microbiología y Biología Molecular de la
Universidad Técnica Estatal de Quevedo (UTEQ) y en un invernadero experimental. El objetivo
fue evaluar la capacidad antagónica de cepas de Trichoderma spp., como biocontrolador frente
a Phytophthora spp., patógeno causante de la enfermedad “muerte ascendente” en plantaciones
de Tectona grandis L.f. (teca).
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3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Aislamiento y caracterización de cepas de Trichoderma spp.
Se logró aislar cuatro tipos de cepas de Trichoderma spp. a partir de muestras de suelo recolectadas
crecimiento de las cepas aisladas fueron registradas exhaustivamente y se detallan en la Tabla
observadas. (Figura 1).
Tabla 1. Características morfológicas de las diferentes cepas de Trichoderma spp
Tipo de cepa Color Forma
Número de anillo
concéntrico
Textura del
micelio
Tipo de
esporulación
Trichoderma 1
Verde
oscuro
Entera 1 Vellosa Dispersa
Trichoderma 2
Verde
Claro
Irregular 1 Polvorienta Dispersa
Trichoderma 3
verde Irregular 1 Granulada Dispersa
Trichoderma 4
Verde
pálido
Entera 2 Vellosa Dispersa
Figura 1. Estructuras microscópicas y macroscópicas óptica mostrando las estructuras reproductivas de las
cepas nativas de Trichoderma spp, A) Formación de anillos concéntricos. B) Forma de los conidióforos.) C)
Hifas y Fiálides a 40X.
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Aislamiento y caracterización de cepas de Phytophthora spp.
Se logró aislar dos cepas de Phytophthora spp., partir de muestras de suelo recolectadas en
plantaciones de teca que presentaban sintomatología de la enfermedad muerte ascendente. Cada
diferenciación entre cepas, tal como se muestra en la Figura 2.
Figura 2. Estructuras microscópicas y macroscópicas óptica mostrando las estructuras reproductivas de las
cepas asexual de las cepas de Phytophthora spp A= Esporangio elipsoides papilados, B= Esporangio con
formas irregulares, Clamidosporas globosas, terminales, 40X
Identicación Molecular de cepas de Trichoderma spp
Los cuatro aislados de Trichoderma,
obtenidas de los aislados fueron comparadas con las disponibles en la base de datos GenBank a
los aislados pertenecen al género Trichoderma,
previa como se detalla la Tabla 2.
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Tabla 2.
Código del
microorganismo
Procedencia
de la muestra
Vecino más cercano
(Nro. de acceso)
Puntuación
máxima
Identica ción
Máxima
T1
Cantón
Buena fe
Trichoderma virens
XM_014101441.1
99.35 100
Trichoderma
virens
T2
Cantón
Valencia
Trichoderma
harzianum
XM_024913138.1
100 100
Trichoderma
harzianum
T3
Cantón
24 de
Mayo
Trichoderma
longibrachiatum
MK910052.1
99.34 100
Trichoder-
ma longi-
brachiatum
T4
Cantón
Quevedo
Trichoderma virens
XM_014101441.1
99.35 100
Trichoderma
virens
T.
virens y T. harzianum. La caracterización molecular fue esencial para validar las observaciones
morfológicas, asegurando la selección correcta de las cepas destinadas a las pruebas de
antagonismo en las siguientes fases del estudio.
Figura 3.
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Identicación Molecular de las cepas de Phytophthora spp.
Phytophthora
(P1 y P2), obtenidos a partir de muestras de suelo recolectadas en plantaciones de teca. Ambos
P. palmivora con un alto grado de similitud genética,
mostrando un 100 % de identidad. Estos hallazgos fueron clave para comprender la estructura
genética de Phytophthora en las plantaciones estudiadas y resultan relevantes para el desarrollo
en plantaciones de teca.
Tabla 3.
Código del
microorganismo
Procedencia de
la muestra
Vecino más
cercano
(Nro. De
acceso)
Puntuación
máxima
Identicación
Máxima
Identidad nal
P1 Cantón Quevedo
Phytophthora
palmivora
MT052675.1
99.35 1W00
Phytophthora
palmivora
P2
Cantón
Buena fe
Phytophthora
palmivora
MH401199.1
99.35 100
Phytophthora
palmivora
Capacidad antagónica In vitro de cepas nativas de las cuatro cepas de Trichoderma frente
a las dos cepas de Phytophthora en medio de cultivo de PDA
Trichoderma en la inhibición del crecimiento
de dos especies de Phytophthora en un medio de cultivo de PDA. Se observó que T. virens 2
mostró una mayor efectividad antagónica en comparación con las otras cepas de Trichoderma
evaluadas frente a las dos cepas de Phytophthora
del crecimiento del patógeno de 59.48 %, 60.85 % y 62.26 %, respectivamente. Estos valores
muestran la capacidad de T. virens
muestra en la Figura 4. Mientras, la Figura 5 proporciona una comparación visual de los efectos
inhibidores de todas las cepas de Trichoderma evaluadas.
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Figura 4. Cultivos duales de las cuatro cepas de Trichoderma (T. virens 1, T. harzianum T. longibrachiatum y
T. virens 2) contra las dos cepas P. palmivora en medio de PDA.
Figura 5. Cultivos duales de las cuatro cepas de Trichoderma (T. virens 1, T. harzianum T. longibrachiatum y T.
virens 2) contra las dos cepas P. palmivora en medio de PDA
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T. longibrachiatum
P. palmivora 2
.virens 2
palmivora 2
Las cepas de T. virens demostraron la mayor capacidad de inhibición en ambos medios de
cultivo, superando a otras especies de Trichoderma.
Capacidad antagónica In vitro de cepas nativas de las cuatro cepas de Trichoderma frente
a las dos cepas de Phytophthora en medio de cultivo de V8
de Trichoderma en la inhibición del crecimiento de dos especies de Phytophthora en un medio
de cultivo de Agar V8. Se observó que T. virens mostró una mayor efectividad antagónica
en comparación con las otras cepas de Trichoderma evaluadas frente a las dos cepas de
Phytophthora,
de 56.13 %, 57.26 % y 66.26 %, donde T. virens exhibió resultados destacados en la capacidad
Figura 7 proporcio
na una comparación visual de los efectos inhibidores de todas las cepas de
Trichoderma evaluadas.
Figura 6.
T.longibrachiatum y T. virens 2) inhibición del crecimiento dos cepas P. palmivora en medio de Agar V8.
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Figura 7. Cultivos duales de las cuatro cepas de Trichoderma (T. virens 1, T. harzianum T. longibrachiatum y
T.virens 2) contra las dos cepas P. palmivora en medio de Agar V8.
T. virens 1 P. palmivora 1
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T. grandis representa un desafío importante,
especialmente por la presencia de Phytophthora spp., que causa la muerte ascendente de
estas plantas. El empleo de cepas de Trichoderma spp. se ha consolidado como una estrategia
et al. (2022) y Andrade-Hoyos et al. (2023),
en su investigación han destacado que cepas como T. virens y T. harzianum muestran altos
porcentajes de inhibición en el crecimiento del patógeno, con cifras que alcanzan hasta el 69.20
Trichoderma spp. emplea diversos mecanismos de acción, entre los que se incluyen
micoparasitismo, competencia por recursos, producción de antibióticos y la inducción de
resistencia sistémica en las plantas, factores que en conjunto se consolidan como aliados
estratégicos en la gestión de enfermedades agrícolas (Cortez et al., 2020; Oyesola et al., 2024).
La combinación de estos mecanismos no solo permite reducir la incidencia de Phytophthora
spp., sino que también contribuye a mejorar la salud del suelo y la productividad del cultivo,
favoreciendo un manejo sostenible y responsable con el medio ambiente (González-León,
2023).
Estudios recientes han documentado una notable diversidad genética y morfológica en aislados
de Trichoderma
(Morales et al., 2020; Barboza-García et al., 2022). No obstante, uno de los principales retos en
la implementación del control biológico es el limitado conocimiento de los agricultores sobre
estas tecnologías. Una investigación realizada por Campo et al., (2022) en Monterrey, Casanare,
control biológico, lo que restringe la adopción de prácticas agrícolas más sostenibles. Este
desconocimiento podría estar vinculada a la persistencia de prácticas convencionales que
deterioran la salud del suelo y comprometen la productividad (Carranza-Patiño, 2024).
Asimismo, Cortez et al.
biológico es un componente clave para fortalecer la resiliencia y sostenibilidad de los sistemas
agrícolas, al fomentar prácticas que disminuyan la dependencia de agroquímicos y promuevan
una agricultura más ecológica. Por lo que, las cepas de Trichoderma spp., especialmente T.
virens y T. harzianum, ofrecen alternativas viables para controlar Phytophthora spp. en T.
grandis, los mecanismos de acción multifacéticos de estas cepas, junto con la necesidad de una
importancia continua de la investigación y aplicación de prácticas agrícolas sostenibles.
4. CONCLUSIONES
Los ensayos in vitro revelaron mayor capacidad antagónica al emplear la cepa de T. virens 1,
alcanzando un 66.26 % de inhibición en el crecimiento radial del patógeno Phytophthora spp.,
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agente causal de la enfermedad conocida como “muerte ascendente” en T. grandis. Resultados
que respaldan la hipótesis de que el uso de Trichoderma
y sostenible frente a los métodos convencionales, contribuyendo de forma activa a la gestión
integrada de enfermedades en plantaciones de teca.
y molecular, constituye un elemento esencial para su incorporación en prácticas agrícolas.
Los métodos empleados, entre ellas, el cultivo en medios selectivos y el análisis molecular,
fortalecen la validez de los resultados obtenidos y respaldan su proyección para ensayos a nivel
de campo.
Este estudio refuerza el papel de Trichoderma spp. como un elemento estratégico en el control
de Phytophthora spp., al proporcionar alternativas innovadoras y sostenibles que podrían
ser incorporadas en futuros programas de manejo agrícola. La incorporación de estas cepas
la necesidad de adoptar prácticas agrícolas más responsables y orientadas a la conservación
ambiental.
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